生物实验室系列环境微生物实验技术,PDF下载

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名称:生物实验室系列环境微生物实验技术
作者:陈坚
出版社:化学工业出版社
格式:pdf,txt 
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生物实验室系列环境微生物实验技术内容简介

免费电子书《生物实验室系列环境微生物实验技术》。

生物实验室系列环境微生物实验技术部分内容

  情况微生物份子检测技术,难降解化合物的微生物降解实验技术,情况微生物种群多样性检测技术。

第一章 情况微生物份子检测技木
  第一节情况样品DNA的提取
   一、概述
   微生物份子生态学是通过分析样品中DNA份子的种类、数量等基因组信息来反应微生物种群结构等信息的。用份子生物学方法对情况微生物多样性、群落结构及变化纪律的研究近年来得到快速发展,已成为最富于活力的生态学科前沿范畴之一,因此对情况样品中的细菌基因组DNA组成状况进行分析评价,必需建立高效、靠得住的DNA提取方法。由于情况样品中微生物的种类组成复杂且常常混杂有年夜量有毒物质,若何使所有细胞裂解、充分释放DNA并有效去除杂质,得到可以进行份子生物学操作的高纯度DNA是研究情况样品中微生物种群结构与功能关系的关键所在。因此,应用份子生物学技术分析复杂的基因组,首先必需制备高纯度的DNA。情况样品的微生物总DNA的提取和纯化方法主要由两部分组成:①温和裂解细胞及消融DNA的技术,包括通过物理、化学或酶解感化裂解细胞,使DNA释放出来。经常使用的物理方法包括煮沸、冻融、微波、超声、研磨等,化学方法包括高盐、表面活性剂SDS、热酚等,酶解法包括裂解酶、溶菌酶、卵白酶K等。凝胶电泳分离法既可以是分析型的,也可以是制备型的,分离片断的份子质量范围在1000~108Da之间。
   一般传统的DNA制备方法是依赖上述方法裂解细胞,某些情况需要用酶来消化卵白质或降解一些细胞组分,然后细胞材料用溶剂抽提,通常为酚/氯仿。分离成两相后,核酸存留在水相中。核酸进一步纯化可用乙醇沉淀法,再重新消融在适宜的缓冲液中。用这些技术得到的DNA是高纯度的,并适用于年夜部分份子生物学操作。近年来,色谱技术在DNA提取中的应用打破了传统方法的统治地位,这些新的方法主要有螯合树脂/纯化柱法、玻璃粉吸附法、磁珠吸附法、免疫亲和法等。
   实际上份子生物学的所有方法从某种水平上都需要进行核酸的分级分离。色谱技术对于某些应用是合适的,好比分离双链核酸和单链核酸、分离质粒与基因组DNA以及从细胞裂解物碎片中分离基因组DNA。但是,凝胶电泳法比其他方法具有更高的分辨率,因而成为一般情况下首选的分离方法。②在情况样品DNA得到充分释放后,通常采用几种化学和酶学方法中的任一种来去除杂卵白、RNA及其他的年夜份子。本书主要介绍情况生物工程范畴内的情况微生物实验技术以及污染物处置和情况生物修复实验技术。在情况微生物实验技术部分,力图体现前沿性和立异性的特点,包括了一些近年来发展的情况微生物实验手段。工业技术类书籍《生物实验室系列情况微生物实验技术》电子书阅读。陈坚完成生物实验室系列情况微生物实验技术》图书在线排行榜。例如,情况微生物的份子检测技术、情况微生物种群多样性的份子检测技术等,预期将为从事该范畴研究的科研工作者提供较好的参考。在污染物处置和情况生物修复实验技术部分,包括了废水的好氧处置、厌氧处置技术,同时也包括了固体烧毁物以及污染场地的修复等范畴的常见的实验技术,体现了内容的延续和系统性特点。.
  本书可供从事情况生物工程研究范畴的教师、研究生和其他研究者参考。...
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